5 灭菌和贮藏
煮沸:特定的培养基只需煮沸灭菌,如TCBS、HE、EMA等。
湿热灭菌:通常高压灭菌采取121 ℃灭菌15分钟。高压灭菌的温度与时间随培养基的种类及数量的不同有所差别。体积超过1000 ml的培养基,必要时适当调整灭菌条件。加热后采取适当的方法冷却,防止加热过度。一般培养基少量分装时高压(103.43kPa)灭菌15分钟即可。
过滤除菌:血清、抗生素、糖类等溶液常用过滤除菌以免成分被破坏。
注意事项:
每批培养基制成后必须进行检定,尤其是测定其pH、颜色、无菌效果和均匀性。
添加成分的制备避免有毒添加成分引起过敏或其他不良反应;抗生素应当现配现用,特殊情况下抗生素溶液分装后冷冻储存,但解冻后的抗生素溶液不能再次冷冻。
制好的培养基,不宜保存过久,以少量勤做为宜。每批应注明名称,分装量,制作日期等,放在4℃冰箱内备用。