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微生物的个体生长和同步生长

获得同步生长的方法——机械筛选法


2.机械筛选法

   利用处于同一生长阶段细胞的体积、大小的相同性,用过滤法、密度梯度离心法或膜洗脱法收集同步生长的细胞。其中以Helmstetter-Cummings 的膜洗脱法较有效和常用。

   此法是根据某些滤膜可吸附与该滤膜(如硝酸纤维素)相反电荷细胞的原理,让非同步细胞的悬液流经此膜,于是一大群细胞被牢牢吸附。然后将滤膜翻转并置于滤器中,其上慢速流下新鲜培养液,最初流出的是未吸附的细胞,不久,吸附的细胞开始分裂,在分裂后的两个子细胞中,一个仍吸附在滤膜上,另一个则被培养液洗脱。若滤膜面积够大,只要收集刚滴下的子细胞培养液即可获得满意的同步生长的细胞。不过,这种细胞在培养过程中,一般经2~3个分裂周期就会很快丧失其同步性的。




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