4 分装
将培养基分装至适当的容器中，容器的体积应为培养基的1～3倍。
液体培养基根据需要分装于不同容量的三角烧瓶中，分装的量不宜超过容器的2/3以免灭菌时外溢。液体培养基分装于试管中，约是试管长度的1/3。
琼脂斜面分装量为试管容量的1/5，灭菌后须趁热放置成斜面，斜面长约为全长的2/3。
半固体培养基分装量约为试管长的1/3，灭菌后直立凝固待用
琼脂平板倾注量为直径90mm的平板通常倒入15ml琼脂培养基，高至少2mm。倾注培养基时，切勿将皿盖全部启开，以免空气中尘埃及细菌落入。凝固冷却后 写上日期，存放在暗处和/或放在4～12 ℃冰箱中的密封袋中，最多存放1周。平板如果表面水分较多，不利于细菌的分离，通常应将平皿倒扣搁置于37℃培养箱内约30分钟待平板平面干燥后使用。
